以下是關(guān)于顯微共聚焦拉曼系統(tǒng)的原理、類型與基本知識的介紹:
一、基本原理
1. 拉曼散射效應(yīng):當(dāng)激光照射樣品時,光子與分子發(fā)生非彈性碰撞,部分光子因分子振動或轉(zhuǎn)動失去/獲得能量,導(dǎo)致散射光頻率發(fā)生變化(即拉曼位移)。通過檢測這種頻率變化,可獲取分子的振動信息,從而分析物質(zhì)成分與結(jié)構(gòu)14。
2. 共聚焦設(shè)計:系統(tǒng)采用針孔或狹縫等空間濾波器,僅接收來自焦平面的光信號,有效排除非焦平面雜散光干擾。此設(shè)計顯著提升了軸向分辨率,實現(xiàn)了樣品的三維層析成像25。
二、系統(tǒng)類型
1. 按共聚焦方式分類
針孔共聚焦:以針孔為空間濾波器,逐點掃描形成高分辨率圖像,適用于厚樣品的三維成像,但光通量較低25。
狹縫共聚焦:采用狹縫分光,快速采集光譜信息,適合活細(xì)胞動態(tài)監(jiān)測等高速場景25。
2. 按功能配置分類
多功能集成型:如上海波銘的RTS2系統(tǒng),內(nèi)置多波長激光器,支持光纖/空間光共焦及針孔共焦模式切換,可擴展拉曼Mapping等功能56。
三、核心部件
1. 顯微鏡:用于觀察和放大樣品,提高成像分辨率3。
2. 共聚焦系統(tǒng):確保激光束精確地聚焦在樣品表面,提高信號質(zhì)量3。
3. 線掃描器:對樣品進行逐行掃描,實現(xiàn)快速、高效的圖像采集3。
4. 光譜儀:對掃描得到的拉曼信號進行采集和處理,形成拉曼光譜圖像3。
5. 計算機控制系統(tǒng):實現(xiàn)整個系統(tǒng)的自動化控制和數(shù)據(jù)處理3。
四、部件拆解
?、?拉曼接口盒:內(nèi)置常用激光器及濾光片組,擴展激光器包含自由光和單模光纖輸入
② 光路轉(zhuǎn)向控制:光路轉(zhuǎn)向控制可向下和向左,與原子力,低溫,探針臺等外設(shè)聯(lián)用,可升級振鏡選項
③ 明視場相機:明視場相機代替目鏡
?、?拉曼顯微鏡:正置科研級金相顯微鏡,標(biāo)配落射式明暗場照明,其他照明方式可升級
?、?電動樣品臺:75x50mm 行程高精度電動載物臺,1μm 定位精度
?、?光纖共焦或者針孔共焦模式:可提高 Z 軸共焦分辨率,Z 分辨<1.5μm@10μm 針孔
?、?CCD- 狹縫共聚焦耦合:標(biāo)配自由光 CCD- 狹縫耦合方式,可使用光譜儀成像模式,高通光量
⑧ 光譜 CCD:背照式深耗盡型光譜 CCD 相機,200-1100nm 工作波段,峰值 QE>90%
?、?320mm 光譜儀:F/4.2 高通光量影響校正光譜儀,1×10^-5 雜散光抑制比
總的來說,顯微共聚焦拉曼系統(tǒng)憑借其原理優(yōu)勢與多樣化的類型選擇,在眾多領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。隨著技術(shù)的不斷進步,未來該系統(tǒng)將在科研及實際應(yīng)用中展現(xiàn)更為廣闊的潛力。